2017成人高考医学实验复习讲义

医学实验是成考专升本医学考试中常考的知识点，那么你知道医学实验有哪些吗?下面本站小编为大家整理的成人高考医学实验复习讲义，希望大家喜欢。

一、提取

黄酮苷类以及极性稍大的苷元(如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等)，一般可用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇-水(1：1)或甲醇。一些多糖苷类则可以用沸水提取。在提取花青素类化合物时，可加入少量酸(如0.1%盐酸)。但提取一般黄酮苷类成分时，则应当慎用，以免发生酸水解反应。为了避免在提取过程中黄酮苷类发生水解，也可按常规提取苷的方法事先破坏酶的活性。大多数黄酮苷元宜用极性较小的溶剂，如用氯仿、乙醚、乙酸乙酯等提取，而对多甲氧基黄酮的游离苷元，甚至可用苯进行提取。

对得到的粗提取物可进行精制处理，常用的方法有：

(一)溶剂萃取法

根据黄酮类化合物极性的大小分别萃取。一般的黄酮苷元可以选择氯仿或者乙醚进行萃取，单糖苷可以选择乙酸乙酯进行萃取，多糖苷可以选择水饱和的正丁醇来萃取。

(二)碱提取酸沉淀法

碱提取酸沉淀法对有酸性的游离的黄酮苷元都是合适的，因为游离的黄酮苷元具有亲脂性，由于有酚羟基显酸性，因此可以溶解在碱水中，当用碱水提取后，再加入酸，能够恢复为原来的游离的状态，具有亲脂性，在酸水中不溶解而形成沉淀。

黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取都采用了这个方法。

在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热时破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成 盐，导致析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。当药材中含有大量果胶、黏液等水溶性杂质时(如花、果类药材)，宜用石灰乳或石灰水代替其他碱性水溶液进行提取，以使上述含羧基的杂质生成钙盐沉淀，不被溶出。这将有利于黄酮类化合物的纯化处理。

(三)炭粉吸附法

主要适于黄酮苷类的精制，大部分黄酮苷类可用7%酚-水洗下。洗脱液经减压蒸发浓缩后，再用乙醚振摇除去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮苷类成分。

二、分离

(一)柱色谱法

分离黄酮类化合物常用的'吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶及纤维素粉等。

1.硅胶柱色谱

此法应用范围最广，按照黄酮类化合物极性的大小先后洗脱，达到分离的目的。主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化(或乙醚化)的黄酮及黄酮醇类。

2.聚酰胺柱色谱

对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。聚酰胺柱色谱可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括苷及苷元、查耳酮与二氢黄酮等。黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时有下述规律：

(1)苷元相同，洗脱先后顺序一般是：叁糖苷，双糖苷，单糖苷，苷元。

(2)母核上增加羟基，洗脱速度即相应减慢。

(3)不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮，二氢黄酮醇，黄酮，黄酮醇。

(4)分子中芳香核、共轭双键多者易被吸附，故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。

3.葡聚糖凝胶(Sephadex gel)柱色谱

对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：Sephadex-G型及Sephadex-LH20型。用葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：

分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目，数目越多，越难洗脱。但分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用。在洗脱时，黄酮苷类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体。

(二)pH梯度萃取法

pH梯度萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂(如乙醚)后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及4%NaOH溶液萃取，来达到分离的目的。一般规律大致如下：

7,4′-二羟基酸性最强，可以溶于5%NaHCO3，其次是含有7或4′-羟基可以溶于5%Na2CO3，然后是含有一般酚羟基可以溶于0.2%NaOH溶液中，最后是含有5-羟基只能溶解在4%NaOH溶液中。

(三) 根据分子中某些特定官能团进行分离

在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基的成分与无此结构的成分，性质不同，可以进行分离。

1.铅盐沉淀法

有邻二酚羟基的成分可被乙酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的成分可被碱式乙酸铅沉淀，据此可将两类成分分离。

2.硼酸络合法

具有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。

一、吸收的主要部位

小肠是营养物质吸收的主要场所，因为：①食物在小肠内已被消化成可吸收成分：小肠内含大量消化液(胰液、胆汁和小肠液)，其中含有消化三大营养物质的各种消化酶，已将食物消化成适合于吸收的小分子物质;②小肠的吸收面积大：小肠粘膜具有很多环形褶皱，其上有大量绒毛和纤毛，使吸收丽积增大约600倍，可达到200m2;③食物在小肠内停留的时问较长，食物得到充分的消化，又有足够的吸收时问，有利于吸收;④小肠绒毛的节律性伸缩和摆动，可加速绒毛内血液和淋巴的流动，有助于吸收。

二、三种主要营养物质吸收形式与途径

(一)糖类的吸收

糖类必须消化成单糖如葡萄糖，半乳糖、果糖，才能透过小肠粘膜上皮细胞吸收入血。肠腔中葡萄糖(或半乳糖)的吸收是逆浓度差进行的主动转运过程，需要消耗能量。

(二)蛋白质的吸收

蛋白质被分解为氨基酸后被吸收。氨基酸的吸收是主动性的，吸收途径是通过毛细血管进入血液循环。

(三)脂肪的吸收

脂肪分解后以甘油、脂肪酸和甘油一酯的形式吸收。

脂肪吸收有两条途径：短、中链脂肪酸和甘油进入毛细血管，而长链脂肪酸及甘油一酯进入毛细淋巴管，经淋巴途径入血。

一、肺通气的原理

当推动肺通气的动力大于阻止肺通气的阻力时便实现了肺通气。

(一)肺通气的动力

肺通气的直接动力是肺泡气与大气之间的压力差，而造成这种压力差的原动力是呼吸肌收缩和舒张所引起的呼吸运动。

1.呼吸运动

呼吸肌收缩和舒张所造成的胸廓的扩大和缩小，称为吸呼运动。呼吸运动是肺通气的原动力。

人体在安静时所进行的吸呼称为平静呼吸。平静吸气时，膈肌和肋问外肌收缩，使胸廓增大，由于胸膜腔的藕联作用，使肺的容积也跟随胸廓的扩大而扩大，肺内压降低，低于大气压，外界气体被吸人肺内。平静呼气时，膈肌和肋问肌舒张，胸廓自然网位，肺随之回缩，肺内压升高，高于大气压，

肺内气体被压出体外。由上可见，推动气体入肺(吸气)或出肺(呼气)的商接动力是大气压与肺内压力的压力差。平静呼吸，吸气是主动的过程，呼气是被动的。

在劳动或运动时.用力而加深加快的呼吸运动称为用力呼吸。用力呼吸时，除膈肌和肋问外肌加强收缩外，还有胸锁乳突肌、胸大肌、胸小肌和肋问内肌参加，使胸廓进一步扩大和缩小。用力呼吸时，吸气和呼气都是主动的。

以肋问外肌收缩为主的呼吸运动称为胸式呼吸。以膈肌收缩为主的呼吸运动称为腹式呼吸。

2.呼吸时肺内压与腑内压的变化

(1)肺内压：肺内压是指气道和肺泡内气体的压力。在呼吸暂停、吸呼道通畅时，肺内压与大气压相等。吸气时肺内压低于大气压，呼气时肺内压高于大气压。

(2)胸膜腔内压：胸膜腔内压是指胸膜腔内的压力，简称胸内在。在平静呼吸过程中，胸内压较大气压低，故称为负压。胸内负压实际卜是肺弹性网缩力造成的，敝当吸气时胸廓扩大，肺被扩张，回缩力增大，胸内负压也增大。呼气时相反，胸内负压减小，但仍为负压。仅当紧闭声门用力呼气，胸内压可成为正值。胸内负压有重要的生理意义：①使肺和小气道维持扩张状态，不致因回缩力而使肺完全塌陷。②有助于静脉血和淋巴的回流。因胸腔内的腔静脉、胸导管等可由胸内负压使其被动扩张，有利于旧流。当胸膜腔的密闭性遭到破坏时，空气立即进入胸膜腔，形成气胸。

(二)肺通气的阻力

肺通气的阻力包括弹性阻力和非弹性阻力两部分。

1.弹性阻力 弹性阻力是指弹性组织(肺和胸廓)在外力作用下变形时所产生的对抗变形的力，即回缩力。弹性阻力占肺通气总阻力的70%左右。弹性阻力越大，吸气时阻力也越大。

胸廓和肺的弹性阻力大小可用顺应性表示。在外力作用下容易扩张，表示顺应性大，弹性阻力小;不易扩张的，表示顺应性小，弹性阻力大。

顺应性=1/弹性阻力

2.非弹性力 非弹性阻力包括惯性阻力、黏滞阻力和气道阻力。惯性阻力是气流在发动、变速、换向时因气流和组织的惯性所产生的阻止运动的因素。平静呼吸频率低时，呼吸频率低、气流流速慢，惯性阻力小，可忽略不计。黏滞阻力来自呼吸时组织相对位置所发生的摩擦。气道阻力来自气体流经呼吸道时气体分子间和气体分子与气道之间的摩擦，是非弹性阻力的主要成分，约占80%～90%。气道口径是影响气道阻力的主要因素。当支气管平滑肌痉挛，气道口径变小，气道阻力增加，单位时间内气流量减少。